소속 Manager : 생화학 실험실(Biochemical lab)

이름 Name : PCR system

기기 Instrument : BIO-RAD Themal Cycler

장소 Location : 과학관 506A호

기능(사용) Usage : Amplification/PCR

특징

- Quick and easy protocol programming — 2 programming options, including the Protocol Autowriter, which automatically generates customized standard, fast, and ultrafast protocols

- Easy protocol editing — the large color touch screen and redesigned navigation make editing and running protocols easy

- Flexible platform — change throughput capability by linking up to 3 additional S1000™ thermal cyclers or adding PC control for up to 32 cyclers

- Advanced file management — USB flash drive compatibility allows universal protocol transfer and unlimited data storage

- Thermal gradient — quickly and easily identify optimal annealing temperatures by using the programmable temperature gradient

​

원리 및 기기

Polymerase chain reaction이라는 중합효소 연쇄 반응을 이용하여 소량의 핵산이 들어 있는 시료로부터 특정 유전자 부위를 기하급수적으로 증폭시킬 수 있는 장비이다.

본 장비는 정확하고 빠른 온도 조절을 통하여 빠른 시간 내에 원하는 유전자 부위를 증폭시킴으로써 신뢰할 수 있는 실험 결과를 얻을 수 있으며, 실험조건에 온도 구배를 줄 수 있어 다양한 PCR 응용에 적합한 기기이다.

​

PCR 원리

PCR은 온도에 따른 DNA의 상태 변화를 이용하여 DNA를 증폭하는 원리를 가지고 있다. 이중나선DNA에 열을 가해 온도를 약 94℃ 정도로 올려주면 두 가닥 사이의 수소결합이 끊어지면서 template DNA가 단일가닥으로 변성된다. 다음 단계에서 온도를 약 55℃ 정도로 낮추면 각각의 template DNA에 primer가 결합하게 된다. 다시 온도를 약 72℃ 로 높이면 DNA Polymerase가 dNTP를 이용하여 DNA합성을 진행시킨다. 이때 사용하는 DNA polymerase는 Taq DNA polymerase로 고온에서도 안정하여 변성이 일어나지 않는다. 이와 같이 PCR은 Template DNA의 변성 (Denaturation), Primer의 결합 (Annealing), DNA 가닥의 합성 (Extension)이 한 Cycle로 구성되어 있으며, 보통 30회 정도를 반복하면 하나의 Template DNA로부터 수 십억 개로 증폭된 DNA Fragment를 얻을 수 있다.