소속 Manager : 생화학 실험실(Biochemical lab)

이름 Name : Automatic Cell Counter

기기 Instrument : BIO-RAD TC20

장소 Location : 과학관 506A호

기능(사용) Usage : Cell Counting

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특징

Compatible with a broad range of cell size and types ; counts cell lines, primary cells (from tissue or blood), stem cells

Innovative auto-focus technology ; removes the variation associated with manual focusing and leads to precise cell counts in 30 sec.

Cell size gates ; user selects a population of interest in complex samples, such as primary cells, or lets the cell counting algorithm do all the work

Cell viability ; analyzes cells accurately using multifocal plane analysis

Easy to archive and analyze ; store up to 100 counts in the onboard memory for access any time

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원리 및 기기

- Hemocytometer를 이용한 manual cell counting 방법을 대치할 수 있는 사용이 매우 간편하고 신속하게 세포수를 측정할 수 있는 기기이다.

- 본 장비는10ul 의 sample로 세포수를 측정하여 1ml 당 세포수로 자동 계산되며, trypan blue 염색시약을 이용하여 세포의 생존율을 측정할 수 있다. 또한, 전용 slide를 이용함으로써 사용자가 시약에 노출되는 위험을 최소화 할 수 있다.

- Trypan Blue 법

Trypan blue 입자는 세포막을 확산의 방법으로 통과하여 세포 내부로 유입되는데 생세포는 ATP 에너지를 이용한 exocytosis로 trypan blue 입자를 다시 세포 외부로 배제하게 되나, 에너지를 발생할 수 없는 사세포는 exocytosis를 할 수 없어 청색으로 염색된다. 세포를 혈청이 없는 배지로 희석하여 대략 200 ~ 2,000 cells/ml 되도록 한다. 1 ml의 현탁된 세포와 4 ml의 0.4% trypan blue 용액을 혼합하여5분간 정치한 후 cell counter를 사용하여 염색되지 않은 생세포수와 염색된 사세포의 수를 측정하여 생존율을 계산한다.